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《细胞生物学实验》教学大纲
课程名称：《基础生物学实验四》细胞生物学部分
英文名称：Basic
Biology Experiment IV
课
号：06099046
学
时：34
学
分：1.5
授课对象：生物科学专业本科生
课程类别：专业必修课
1、课程任务与目的
细胞生物学是一门实践性强，对实验仪器要求较高的课程，因此开设本课程的目的是使学生掌握细胞生物学实验设备的操作方法，具备观察和研究细胞结构与功能的基本方法，学会发现问题和解决问题的基本技能，为毕业后从事生物学相关的科研和教学工作奠定基础。
2、教学内容与要求：
1．光学显微镜使用及显微摄影技术
了解显微镜各部分的名称、结构和功能，学习普通光学显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜、微分干涉差显微镜、倒置显微镜、显微操作仪等的构造和使用方法。
掌握显微摄影的基本方法，学会显微镜的视差校正，曝光控制，底片反差控制，及底片冲洗和放大技术。
2．线粒体和液泡系的超活染色
掌握动植物线粒体的染色方法，观察线粒体的分布、形状，分析染色反应的原理。
3．线粒体、叶绿体的分离及观察
掌握差速离心法分离动、植物细胞器方法步骤，观察植物细胞叶绿体的分布、形状。
4．石蜡组织切片
学习石蜡包埋切片技术，掌握细胞核和细胞质的区分染色方法（苏木涩精/曙红）、Feulgen染色法，观察染色结果，了解反应原理。
5．细胞骨架的免疫荧光染色
学习间接免疫荧光染色技术，观察细胞骨架在细胞中的分布，认识细胞骨架在生命活动中的重要性。
6．植物染色体研究技术
学习压片法制备植物有丝分裂标本的制备方法，观察并掌握有丝分裂过程的特性，要求描述有丝分裂各个阶段的特点，掌握BSG法制备C带核型标本的技术，了解C带核型在细胞遗传学分析中的作用。
7．哺乳动物染色体研究技术
学习哺乳动物外周血培养技术，掌握滴片法、涂片法等制备染色体玻片的基本方法，观察动物细胞有丝分裂各个阶段的特点。学习硝酸银染色和Giemsa染色技术，了解G带核型在细胞遗传学分析中的作用。
8．减数分裂中的染色体行为比较
以不同种类不同性别的昆虫为材料，制作染色体玻片，比较减数分裂中染色体行为的异同，了解昆虫配子发生的过程。
9．动物细胞原代培养
了解原代细胞培养的基本方法及操作过程。学习细胞分散、细胞计数、培养基的配制及酸碱度的调节。
10．电子显微镜技术
了解透射和电子电子显微镜的基本原理、透射电镜样品制备，学习透射、扫描电子显微镜观察和摄影的基本方法。
3、对学生能力培养的要求
注重培养学生发现问题和解决问题的能力，学习规范化的操作技能，培养求实创新的科学精神。
4、学时分配
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序号
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实验项目
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类别
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学时
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要求
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1.
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光学显微镜使用及显微摄影技术
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综合性实验
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4
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必作
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2.
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线粒体和液泡系的超活染色
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验证性实验
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3
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必作
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3.
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线粒体、叶绿体的分离及观察
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验证性实验
|
3
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必作
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4.
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石蜡组织切片
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综合性实验
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6
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必作
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5.
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细胞骨架的免疫荧光染色
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验证性实验
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3
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必作
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6.
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植物染色体研究技术
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综合性实验
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6
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选作
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7.
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哺乳动物染色体研究技术
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综合性实验
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6
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选作
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8.
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减数分裂中的染色体行为比较
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设计性实验
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6
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选作
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9.
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动物细胞原代培养
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验证性实验
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6
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选作
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10.
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电子显微镜技术
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验证性实验
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3
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必作
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5、考核方式
单独考核，与理论课成绩无关。以平时实验作业成绩的平均分做为课程结业成绩，或采用抽查实验、理论考试的方式。
6、教材与参考书
[1]
刘鼎新. 1997. 细胞生物学研究方法与技术（第二版）.
北京:
北医/协和医大联合出版社.
[2]
杨汉民. 1997. 细胞生物学实验（第二版）.
北京:
高等教育出版社.
[3]
D. L.斯佩克特等（黄培堂等译）.
2001. 细胞实验指南（上、下）.
北京:
科学出版社.
[4]
郭葆玉. 1998. 细胞分子生物学实验操作指南.
上海:
第二军医大学出版社.
[5]
李国珍. 1985.
染色体及其研究方法.
北京:
科学出版社.
[6]
赵刚,
刘建中. 2002. 医学细胞生物学实验与习题.
北京:
科学出版社.
2004年9月修订
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